Question

【題目】【加試題】回答下列（一）、（二）小題：

（一）請回答與“固定化酶”實驗有關的問題：

（1）—淀粉酶可以通過培養枯草桿菌來生產， 是篩選高表達量菌株的最簡便方法之一。篩選出的菌株在發酵生產之前還需利用 培養基進行擴大培養。

（2）利用物理或化學的方法將—淀粉酶固定后，成為 且又有酶活性的制劑。若用吸附法固定時，在裝柱后需要用 緩慢沖洗，直至流出液不使淀粉-碘混合液發生 為止。

（3）將淀粉溶液以一定流速從反應柱上端滴入，再在下端接取少量流出液進行KI-I2顏色測試，結果不呈現紅色。對此現象的解釋錯誤的是

A．反應柱中沒有—淀粉酶被固定

B．流速過快淀粉未被水解

C．接取的流出液是蒸餾水

D．流速過慢淀粉被水解成葡萄糖

（二）欲利用基因工程技術將人胰島素基因轉入到小鼠基因組中，以期利用小鼠生產出人胰島素，請回答：

（1）若用逆轉錄的方法獲得人胰島素基因，則需要從人體相應的 細胞中提取mRNA，獲得的人胰島素基因經過相應處理后，再利用顯微注射技術將其注入到受體細胞中，下列最不適合作為受體細胞的是

（A．受精卵B．胚胎干細胞C．第一次卵裂形成的細胞D．第三次卵裂形成的細胞）

（2）為獲得更多的受體細胞，可先對成年雌鼠注射激素進 處理,將獲得的卵母細胞培養成熟，與經 處理的精子結合形成受精卵后再進行后期操作。

（3）導入胰島素基因的受體細胞還需借助 、 等技術才能成為轉基因小鼠。

Answer 1

【答案】（一）（1）單菌落分離 液體（2）不溶于水 10倍體積蒸餾水 褪色 （3）D

（二）（1）胰島β細胞 B （2）超數排卵獲能 （3）胚胎體外培養 胚胎移植

【解析】

試題分析：（一）（1）要篩選高表達量菌株的最簡便方法可以用單菌落分離法，要進行擴大培養應在液體培養基中。

（2）利用物理或化學的方法將—淀粉酶固定后，成為不溶于水且又有酶活性的制劑。如果用吸附法固定時，在裝柱后需要用10倍體積蒸餾水緩慢沖洗，直至流出液不使淀粉-碘混合液發生褪色為止。

（3）出現紅色說明淀粉在固定的淀粉酶作用下被水解，沒有出現紅色，有可能是反應柱中沒有—淀粉酶被固定，A正確。也有可能是流速過快淀粉未被水解，B正確。也有可能接取的流出液是蒸餾水，C正確。如果水解成了葡萄糖應是紅色，D錯誤。

（二）（1）胰島素的mRNA需要從胰島B細胞中獲取。動物受體細胞最好是受精卵，分化程度越低越好，胚胎干細胞已經是有所分化的細胞，B最不合適。

（2）要獲得更多的卵細胞可以用性激素進行超數排卵處理，培養成熟后可以與獲能的精子進行體外受精形成受精卵。

（3）將目的基因導入受體細胞后還需要早期胚胎培養和胚胎移植等技術才能發育成真正的個體成為轉基因小鼠。