Question

【題目】若要利用某目的基因（見圖甲）和P1噬菌體載體（見圖乙）構建重組DNA(見圖丙），限制性核酸內切酶的酶切位點分別是BglⅡ(A↓GATCT)、EcoRI（G↓AATTC)和Sau3AⅠ(↓GATC)。下列分析合理的是

A. 用EcoRⅠ切割目的基因和P1噬菌體載體

B. 用BglⅡ和EcoRⅠ切割目的基因和P1噬菌體載體

C. 用BglⅡ和Sau3AⅠ切割目的基因和P1噬菌體載體

D. 用EcoRⅠ和Sau3AⅠ切割目的基因和P1噬菌體載體

Answer 1

【答案】D

【解析】用EcoR Ⅰ切割目的基因和P1噬菌體載體，產生相同的黏性末端，用DNA連接酶連接時可能會發生反向連接，故A項錯誤；用BglⅡ和EcoRⅠ切割目的基因會產生兩種DNA片段，一種含有目的基因，一種不含目的基因（該片段相當于只用EcoRⅠ切割），故B項錯誤；用BglⅡ和Sau3AⅠ切割目的基因和P1噬菌體載體，也能產生相同的黏性末端，可能會發生反向連接，故C項錯誤；只有用EcoRⅠ和Sau3AⅠ切割目的基因和P1噬菌體載體，才能產生不同的黏性末端，防止發生反向連接，這樣目的基因插入運載體后，RNA聚合酶的移動方向肯定與圖丙相同，故D項正確。