Question

【題目】某同學欲從被污染的土壤中采用富集培養(yǎng)的方法篩選出能高效降解原油的細菌，經過的一般步驟是采集菌樣→富集培養(yǎng)→純種分離→性能測定，實驗過程如圖所示，請分析回答：

（1）下面兩組圖是采用純化微生物培養(yǎng)的兩種接種方法接種后培養(yǎng)的效果圖解，請分析接種的具體方法。

圖A所示的接種方法是____________，圖B所示的接種方法是_____________。

（2）在篩選過程中，應將__________接種于以___________為唯一碳源的培養(yǎng)基上，從功能上講，該培養(yǎng)基屬于___________培養(yǎng)基。

（3）現(xiàn)有1L土壤浸出液，用無菌吸管吸取1mL液樣至盛有9mL無菌水的試管中，依次稀釋l03倍．各取0.1mL已稀釋103倍的水樣分別接種到圖A的三個培養(yǎng)基上培養(yǎng)，記錄的菌落數(shù)分別為55、56、57，則1L原土壤浸出樣液中菌體數(shù)為_________。

（4）為篩選出高效菌株，可比較單菌落周圍透明帶區(qū)域的大小．一般透明帶區(qū)域越大說明該菌株降解原油的能力__________。

（5）配制培養(yǎng)基時各種成分在溶化后分裝前必須進行_________，接種前要進行 ____________，在整個微生物的分離和培養(yǎng)中，一定要注意在___________條件下進行。

Answer 1

【答案】 稀釋涂布平板法 平板劃線法 土壤樣品稀釋液 原油 選擇 5.6×108 越強 pH調整 高壓蒸汽滅菌 無菌

【解析】試題分析：富集培養(yǎng)技術實際是一種選擇分離微生物的技術，其所用培養(yǎng)基為選擇培養(yǎng)基，本題是利用生物對特殊碳源的需求，配制特殊的培養(yǎng)基來進行生物的篩選，解答過程中要注意運用無菌操作的一些技術要求。

（1）據(jù)圖分析：圖A中菌落均勻分布，接種方法是稀釋涂布平板法，圖B的接種方法是平板劃線法。（2）在篩選過程中，應將土壤樣品稀釋液接種于以原油為唯一碳源的培養(yǎng)基上，從功能上講，該培養(yǎng)培養(yǎng)基屬于選擇培養(yǎng)基。（3）每升原土壤浸出液樣中菌體數(shù)為：（55+56+57）÷3÷0.1×1000×103=5.6×108個。（4）一般情況下，透明帶區(qū)域越大說明該菌株的降解對羥基苯甲酸的能力越強。（5）配制培養(yǎng)基時各種成分在溶化后分裝前必須進行pH調整，接種前要進行高壓蒸汽滅菌，在整個微生物的分離和培養(yǎng)中，一定要注意在無菌條件下進行。