Question

【題目】某質粒上有SalⅠ、HindⅢ、Bam_HI三種限制酶切割位點，同時還含有抗四環素基因和抗氨芐青霉素基因．利用此質粒獲得轉基因抗鹽煙草的過程如圖所示，請回答下列問題．
（1）在構建重組質粒時，應選用和兩種限制酶對進行切割，然后進行連接，以保證重組DNA序列的唯一性．
（2）為篩選出導入了重組質粒的農桿菌，應在培養基中加 ， 理由是 ．
（3）將轉入抗鹽基因的煙草細胞培育成完整的植株需要用技術，即通過和兩個主要過程最終形成完整植株．

Answer 1

【答案】
（1）SalⅠ； HindⅢ；質粒和抗鹽基因的DNA
（2）氨芐青霉素；重組質粒中含抗氨芐青霉素基因而抗四環素基因被破壞
（3）植物組織培養；脫分化；再分化
【解析】解：（1）質粒和含有目的基因的外源DNA分子上都含有SalI、Hindm、BamHI三種限制酶切割位點，其中BamHI的切割位點位于目的基因上，用該酶切割會破壞目的基因；若只用SalI一種限制酶切割可能會導致目的基因與運載體反向連接；因此在構建重組質粒時，應選用SalI和HindIII兩種限制酶對質粒和抗鹽基因進行切割，然后進行連接，以保證重組DNA序列的唯一性．（2）選用SalI、HindIII兩種酶對質粒進行切割時，形成的重組質粒中含抗氨芐青霉基因而抗四環素基因被破壞，為篩選出導入了重組質粒的農桿菌，應在培養基中加入氨芐青霉素．（3）將轉入抗鹽基因的煙草細胞培育成完整的植株需要用植物組織培養技術，即通過 脫分化和再分化 兩個主要過程最終形成完整植株．

所以答案是：（1）SalⅠHindⅢ質粒和抗鹽基因的DNA （2）氨芐青霉素 重組質粒中含抗氨芐青霉素基因而抗四環素基因被破壞（3）植物組織培養 脫分化 再分化

【考點精析】本題主要考查了基因工程的原理及技術的相關知識點，需要掌握基因工程的原理是利用DNA重組技術才能正確解答此題．