Question

【題目】小鼠是繼果蠅之后的又一種模式動物，下圖1表示生產長效胰島素轉基因小鼠培育過程示意圖，圖2表示圖1中③表達載體構建過程圖示。請回答下列問題：

（1）圖1中的過程①注射A物質的目的是使供體母鼠 ， 若進行體外受精，則需將未成熟的卵子培養至才具備受精能力。
（2）在圖2中，當目的基因的DNA用HindⅢ、BamhⅠ完全酶切后反應管中有種DNA片段，經過程⑧形成的重組質粒上將有限制酶的切點。
（3）為確保目的基因在小鼠細胞中進行表達，圖2的⑧過程在構建基因的表達載體時，需將目的基因插在兩種片段之間，將表達載體送入細胞時，圖1中的過程④常用的方法是。
（4）為檢測目的基因是否成功表達，通常采用的方法是。

Answer 1

【答案】
（1）超數排卵；減數第二次分裂中期（或MⅡ中期）
（2）4；HindⅢ（或1種）
（3）啟動子、終止子；顯微注射
（4）抗原-抗體雜交
【解析】（1）分析題圖可知，過程①注射的激素是促性腺激素，目的是促進良種母畜超數排卵；體外受精時，要將未成熟的卵子培養至減數第二次分裂中期（或MⅡ中期）才具備受精能力。（2）在圖2中，目的基因的DNA含有1個HindⅢ切割位點，2個BamhⅠ切割位點，因此該目的基因DNA用HindⅢ、BamhⅠ完全酶切后反應管中有4種DNA片段；目的基因是用限制酶HindⅢ、BamhⅠ切割獲得的，而質粒是用限制酶HindⅢ、BclⅠ切割的，由于BamhⅠ和BclⅠ切割形成的黏性末端相同，因此目的基因和質粒可經DNA連接酶連接形成重組質粒，但重組質粒上有HindⅢ（或1種）的切點，沒有BamhⅠ和BclⅠ切點（3）為確保目的基因在小鼠細胞中進行表達，圖2的⑧過程在構建基因的表達載體時，需將目的基因插在啟動子、終止子兩種片段之間；將目的基因導入動物細胞最有效的方法是顯微注射法。 （4）若目的基因成功表達，細胞中會產生相應的蛋白質，通常采用抗原-抗體雜交法進行鑒定。
【考點精析】利用基因工程的原理及技術對題目進行判斷即可得到答案，需要熟知基因工程的原理是利用DNA重組技術．