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科目：高中生物 來(lái)源：上海市長(zhǎng)寧區(qū)2012屆高三上學(xué)期期末質(zhì)量抽測(cè)生物試題 題型：071
回答有關(guān)生物工程的問(wèn)題。
小鼠是實(shí)驗(yàn)室常用的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物，如：利用小鼠制備抗X病毒單克隆抗體、利用小鼠進(jìn)行DNA重組研究中導(dǎo)致了“基因敲除”技術(shù)的出現(xiàn)。
用小鼠制備抗X病毒單克隆抗體。
1．將小鼠等分為兩組，甲組定期間隔注射適量的含X病毒的溶液，其目的是_________；乙組注射_________。
2．一段時(shí)間后，取甲組小鼠脾臟中的相應(yīng)細(xì)胞與小鼠骨髓瘤細(xì)胞融合，細(xì)胞融合的結(jié)構(gòu)特點(diǎn)是_________。融合形成的雜交瘤細(xì)胞特點(diǎn)是_________。
3．為了保存有價(jià)值的雜交瘤細(xì)胞系，通常用超低溫將其凍存，請(qǐng)分析其原_________。
用小鼠進(jìn)行DNA重組研究中形成的“基因敲除”技術(shù)，能“敲除”DNA分子上的特定基因。該技術(shù)的主要過(guò)程如下：
第一步：分離小鼠胚胎干細(xì)胞，這些細(xì)胞中含有需要改造的基因，稱“靶基因”。
第二步：獲取與“靶基因”同源的DNA片斷，利用特定技術(shù)在該DNA片段上插入neoR基因（新霉素抗性基因）成為突變DNA（如下圖），使該片段上的靶基因失活。
第三步：將插入neoR基因（新霉素抗性基因）的靶基因轉(zhuǎn)移入胚胎干細(xì)胞，再通過(guò)同源互換，用失活靶基因取代兩個(gè)正常靶基因中的一個(gè)，完成對(duì)胚胎干細(xì)胞的基因改造。
第四步：將第三步處理后的胚胎干細(xì)胞，轉(zhuǎn)移到特定培養(yǎng)基中篩選培養(yǎng)。
其基本原理如下圖所示：
4．第二步中neoR基因插入靶基因使用的工具酶是_________。neoR基因不僅能使靶基因失活，還是_________；“靶基因失活”的含義是_________。
5．從研究者成功獲得如上圖所示的“敲除”一個(gè)靶基因的胚胎干細(xì)胞，到將該細(xì)胞培育成“基因敲除”小鼠，運(yùn)用到的生物技術(shù)有_________、_________等。
6．科學(xué)家可以通過(guò)“基因敲除”來(lái)研究基因的功能，4題中獲得的基因敲除小鼠，能否直接用來(lái)研究基因功能并說(shuō)明原因_________。
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科目：高中生物 來(lái)源： 題型：
35.（7分）棉鈴蟲(chóng)是一種危害棉花的害蟲(chóng)。我國(guó)科學(xué)工作者發(fā)現(xiàn)一種生活在棉鈴蟲(chóng)消化道內(nèi)的蘇云金桿菌能分泌一種毒蛋白使棉鈴蟲(chóng)致死，而這種毒蛋白對(duì)人畜無(wú)害。通過(guò)基因工程方法，科學(xué)家采用花粉管通道法將毒蛋白基因轉(zhuǎn)入棉花植株并成功表達(dá)，棉鈴蟲(chóng)吃了這種轉(zhuǎn)基因棉花的植株后就會(huì)死亡。花粉管通道法是指：利用植物花粉萌發(fā)時(shí)形成的花粉管通道將毒蛋白基因送入胚囊，進(jìn)而導(dǎo)入尚不具備細(xì)胞壁的合子或早期胚細(xì)胞，最終形成含有目的基因的種胚。此種方法的優(yōu)點(diǎn)是操作簡(jiǎn)便，省去了組培的復(fù)雜過(guò)程。
（1）利用花粉管通道法將毒蛋白基因?qū)朊藁?xì)胞，此過(guò)程是基因操作的基本步驟中的第三步，即 。構(gòu)建基因表達(dá)載體時(shí)要把目的基因整合到Ti質(zhì)粒的T-DNA上，其原因是 。
（2）基因工程的工具酶可以將目的基因切下并連接到運(yùn)載體上。限制酶可以識(shí)別特定的DNA序列，并切斷 鍵。下列所示的黏性末端是由 種限制酶作用產(chǎn)生的。
（3）用標(biāo)記的特異性抗體可以直接檢測(cè)毒蛋白，這種檢測(cè)方法稱為 。
也可在宏觀性狀水平檢測(cè)該目的基因是否表達(dá)，方法是 。已知轉(zhuǎn)基因植物中毒素蛋白只結(jié)合某些昆蟲(chóng)腸上皮細(xì)胞表面的特異受體，使細(xì)胞膜穿孔，腸細(xì)胞裂解，昆蟲(chóng)死亡。而該毒素蛋白對(duì)人類的風(fēng)險(xiǎn)相對(duì)較小，原因是人類腸上皮細(xì)胞 。
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