科目：高中生物 來源：2013屆江蘇省揚州市高三下學期5月考前適應性考試生物試卷（帶解析） 題型：綜合題
研究人員從血管內皮瘤中發現了一種新的血管增生抑制劑——內皮抑素，它能有效地抑制血管增生。下面是獲得重組內皮抑素的方法，請分析回答下列問題。
（1）從肝細胞中分離出相應的RNA，經________獲得內皮抑素基因，再經________進行擴增，以獲得更多的目的基因。
（2）擴增的目的基因與pUC18質粒(如圖所示)都用EcoR Ⅰ和BamH Ⅰ進行雙酶切，然后用DNA連接酶進行連接，構建重組質粒。雙酶切避免了目的基因與載體________連接，還減少了目的基因與目的基因、載體與載體的連接，提高了重組質粒的比例。
（3）大腸桿菌pUC18質粒的LacZ基因中如果沒有插入外源基因，LacZ基因便可表達出β半乳糖苷酶，當培養基中含有IPTG和Xgal時，Xgal便會被β半乳糖苷酶水解成藍色，大腸桿菌將形成藍色菌落。反之，則形成白色菌落。選擇培養基中除含有大腸桿菌必需的葡萄糖、氮源、無機鹽、水、生長因子等營養物質外，還應加入的物質有________和氨芐青霉素。成功導入重組質粒的大腸桿菌在培養基中形成________顏色的菌落，原因是__________________。
（4）從選擇培養基中挑取所需的單個菌落接種于液體培養基中培養，獲得粗提表達產物。將等量毛細血管內皮細胞接種于細胞培養板，37 ℃培養。將等量不同濃度的粗提表達產物加進培養孔中，72 h后在顯微鏡下觀察細胞存活情況并統計(或記錄)活的內皮細胞數目，實驗結果如下表所示。
| 粗提表達產物濃度/(μg·mL－1) | 0 | 2 | 4 | 6 | 8 | 10 |
| 活的內皮細胞數目(×102) | 12 | 6 | 2 | 1 | 0.5 | 0.5 |
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科目：高中生物 來源：2011屆河北省南宮中學高三12月月考生物試卷 題型：綜合題
含有32P或31P的磷酸，兩者化學性質幾乎相同，都可參與DNA分子的組成，但32P比31P質量大。現將某哺乳動物的細胞放在含有31P磷酸的培養基中，連續培養數代后得到G0代細胞。然后將G0代細胞移至含有32P磷酸的培養基中培養，經過第1、2次細胞分裂后分別得到G1、G2代細胞。再從G0、G1、G2代細胞中提取出DNA經密度梯度離心后得到結果如圖。由于DNA分子質量不同，因此在離心管內的分布不同。若①②③分別表示輕、中、重三種DNA分子的位置，請回答：
（1）G0、G1、G2三代DNA離心后的試管分別是圖中的：
G0 、G1 、G2 。
（2）培養基中需加入ATP，說明 。培養基中還需加入
（3）圖中①、②兩條帶中DNA分子所含的元素磷分別是：
條帶① ，條帶② 。
（4）上述實驗結果證明DNA的復制方式是 。
（5）DNA能夠準確復制原因： 。
（6）用同位素32P、35S分別標記噬菌體和大腸桿菌的DNA和蛋白質，然后進行“噬菌體侵染細菌實驗”。侵染后產生的子代噬菌體與親代噬菌體形態完全相同。則子代噬菌體的DNA和蛋白質中含有的標記元素應該是 （ ）
| A．31P、32P、32S | B．31P、32P、35S |
| C．31P、32P、32S、35S | D．33P、32S、35S |
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科目：高中生物 來源：2012-2013學年江蘇省揚州市高三下學期5月考前適應性考試生物試卷（解析版） 題型：綜合題
研究人員從血管內皮瘤中發現了一種新的血管增生抑制劑——內皮抑素，它能有效地抑制血管增生。下面是獲得重組內皮抑素的方法，請分析回答下列問題。
（1）從肝細胞中分離出相應的RNA，經________獲得內皮抑素基因，再經________進行擴增，以獲得更多的目的基因。
（2）擴增的目的基因與pUC18質粒(如圖所示)都用EcoR Ⅰ和BamH Ⅰ進行雙酶切，然后用DNA連接酶進行連接，構建重組質粒。雙酶切避免了目的基因與載體________連接，還減少了目的基因與目的基因、載體與載體的連接，提高了重組質粒的比例。
（3）大腸桿菌pUC18質粒的LacZ基因中如果沒有插入外源基因，LacZ基因便可表達出β半乳糖苷酶，當培養基中含有IPTG和Xgal時，Xgal便會被β半乳糖苷酶水解成藍色，大腸桿菌將形成藍色菌落。反之，則形成白色菌落。選擇培養基中除含有大腸桿菌必需的葡萄糖、氮源、無機鹽、水、生長因子等營養物質外，還應加入的物質有________和氨芐青霉素。成功導入重組質粒的大腸桿菌在培養基中形成________顏色的菌落，原因是__________________。
（4）從選擇培養基中挑取所需的單個菌落接種于液體培養基中培養，獲得粗提表達產物。將等量毛細血管內皮細胞接種于細胞培養板，37 ℃培養。將等量不同濃度的粗提表達產物加進培養孔中，72 h后在顯微鏡下觀察細胞存活情況并統計(或記錄)活的內皮細胞數目，實驗結果如下表所示。
|
粗提表達產物濃度/(μg·mL－1) |
0 |
2 |
4 |
6 |
8 |
10 |
|
活的內皮細胞數目(×102) |
12 |
6 |
2 |
1 |
0.5 |
0.5 |
實驗結果說明_____________________________________________________
_____________________________________________________________。
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科目：高中生物 來源：2011-2012學年北京市海淀區高三上學期期中練習生物試卷 題型：綜合題
(10分）研究人員從血管內皮瘤中發現了一種新的血管增生抑制劑一內皮抑素，它能有效地抑制血管增生。下面是獲得重組內皮抑素的方法，請分析回答下列問題：
(1) 從肝細胞中分離總RNA，經_________獲得cDNA，之后經過_________擴增內皮抑素基因。
(2) 擴增的目的基因與PUC18質粒（如圖14所示）都用EcoR I和BamH I進行雙酶切，然后用DNA連接酶進行連接，構建重組質粒。雙酶切避免了目的基因與載體________連接，還減少了________的連接，提高了重組質粒的比例。
(3) 大腸桿菌pUC18質粒的LacZ基因中如果沒有插入外源基因，lacZ基因便可表達出β-半乳糖苷酶，當培養基中含有IPTG和X-gal時，X-gal便會被β-半乳糖苷酶水解成藍色，大腸桿菌將形成藍色菌落。反之，則形成白色菌落。
選擇培養基中除含有大腸桿菌必需的葡萄糖、氮源、無機鹽、水、生長因子等營養物質外，還應加入_______物質。成功導入重組質粒的大腸桿菌在培養基中形成______________顏色的菌落，原因是_____________________。之所以選擇大腸桿菌作為基因工程的受體菌，其突出的優點是：___________________________________
(4) 從選擇培養基中挑取所需的單個菌落接種于液體培養基中培養，獲得粗提表達產物。將等量毛細血管內皮細胞接種于細胞培養板，370C培養。將等量不同濃度的粗提表達產物加進培養孔中，72h后在顯微鏡下觀察細胞存活情況并，______________實驗結果如下表所示。
結果說明__________________________________________
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科目：高中生物 來源：2010-2011學年河北省高三12月月考生物試卷 題型：綜合題
含有32P或31P的磷酸，兩者化學性質幾乎相同，都可參與DNA分子的組成，但32P比31P質量大。現將某哺乳動物的細胞放在含有31P磷酸的培養基中，連續培養數代后得到G0代細胞。然后將G0代細胞移至含有32P磷酸的培養基中培養，經過第1、2次細胞分裂后分別得到G1、G2代細胞。再從G0、G1、G2代細胞中提取出DNA經密度梯度離心后得到結果如圖。由于DNA分子質量不同，因此在離心管內的分布不同。若①②③分別表示輕、中、重三種DNA分子的位置，請回答：
（1）G0、G1、G2三代DNA離心后的試管分別是圖中的：
G0 、G1 、G2 。
（2）培養基中需加入ATP，說明 。培養基中還需加入
（3）圖中①、②兩條帶中DNA分子所含的元素磷分別是：
條帶① ，條帶② 。
（4）上述實驗結果證明DNA的復制方式是 。
（5）DNA能夠準確復制原因： 。
（6）用同位素32P、35S分別標記噬菌體和大腸桿菌的DNA和蛋白質，然后進行“噬菌體侵染細菌實驗”。侵染后產生的子代噬菌體與親代噬菌體形態完全相同。則子代噬菌體的DNA和蛋白質中含有的標記元素應該是 （ ）
A．31P、32P、32S B．31P、32P、35S
C．31P、32P、32S、35S D．33P、32S、35S
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