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35.（7分）棉鈴蟲是一種危害棉花的害蟲。我國科學工作者發現一種生活在棉鈴蟲消化道內的蘇云金桿菌能分泌一種毒蛋白使棉鈴蟲致死，而這種毒蛋白對人畜無害。通過基因工程方法，科學家采用花粉管通道法將毒蛋白基因轉入棉花植株并成功表達，棉鈴蟲吃了這種轉基因棉花的植株后就會死亡。花粉管通道法是指：利用植物花粉萌發時形成的花粉管通道將毒蛋白基因送入胚囊，進而導入尚不具備細胞壁的合子或早期胚細胞，最終形成含有目的基因的種胚。此種方法的優點是操作簡便，省去了組培的復雜過程。

（1）利用花粉管通道法將毒蛋白基因導入棉花細胞，此過程是基因操作的基本步驟中的第三步，即                  。構建基因表達載體時要把目的基因整合到Ti質粒的T-DNA上，其原因是                    。

（2）基因工程的工具酶可以將目的基因切下并連接到運載體上。限制酶可以識別特定的DNA序列，并切斷         鍵。下列所示的黏性末端是由         種限制酶作用產生的。

（3）用標記的特異性抗體可以直接檢測毒蛋白，這種檢測方法稱為                 。

也可在宏觀性狀水平檢測該目的基因是否表達，方法是                  。已知轉基因植物中毒素蛋白只結合某些昆蟲腸上皮細胞表面的特異受體，使細胞膜穿孔，腸細胞裂解，昆蟲死亡。而該毒素蛋白對人類的風險相對較小，原因是人類腸上皮細胞                 。

植物雖不能動，但卻具有某些防御機制以對抗外界的傷害，如利用體表的毛、刺、幾丁質或木栓質來保護植株本身免于受傷害；也會利用囊泡內的次級代謝物（如植物堿和單寧酸等）來防御掠食者；更會分泌化學物質抑制別種植物的種子萌芽或生長，以降低資源競爭。有些植物的次級代謝物可用于制藥，如奎寧（quinine）。無論草食動物或侵略者是否存在，這些防御構造或化學物質一直存在植物體。

傷害也可誘導植物產生防御機制，如葉片被寄生蜂咬傷時，植物會快速產生與草食動物消化酵素結合的蛋白酶抑制劑。從蕃茄的實驗結果得知，受傷的葉子會將系統素前驅蛋白切割出由18個胺基酸組成的系統素（systemin），經由受傷組織的細胞壁或細胞間隙運輸到鄰近的韌皮部，再傳送到整個植物體。系統素會與細胞膜的受器結合，引起細胞內產生茉莉酸（jasmonic acid），并傳訊給細胞核內相關的基因，使整株植物產生蛋白酶抑制劑，達到防御的效果。下列有關蕃茄誘導防御機制之敘述，哪些正確？（應選三項）

A 植物體受傷時，會誘導系統素的產生

B 系統素與茉莉酸結合而活化防御機制

C 系統素在細胞壁和細胞間隙移動，進入韌皮部而傳遍全株

D 系統素將訊息直接傳遞給細胞核內相關的基因，并令其產生蛋白質抑制劑

E 茉莉酸將訊息傳遞給細胞核內的特定基因，并進而在細胞質內制造蛋白

酶抑制劑

植物雖不能動，但卻具有某些防御機制以對抗外界的傷害，如利用體表的毛、刺、幾丁質或木栓質來保護植株本身免于受傷害；也會利用囊泡內的次級代謝物（如植物堿和單寧酸等）來防御掠食者；更會分泌化學物質抑制別種植物的種子萌芽或生長，以降低資源競爭。有些植物的次級代謝物可用于制藥，如奎寧（quinine）。無論草食動物或侵略者是否存在，這些防御構造或化學物質一直存在植物體。

傷害也可誘導植物產生防御機制，如葉片被寄生蜂咬傷時，植物會快速產生與草食動物消化酵素結合的蛋白酶抑制劑。從蕃茄的實驗結果得知，受傷的葉子會將系統素前驅蛋白切割出由18個胺基酸組成的系統素（systemin），經由受傷組織的細胞壁或細胞間隙運輸到鄰近的韌皮部，再傳送到整個植物體。系統素會與細胞膜的受器結合，引起細胞內產生茉莉酸（jasmonic acid），并傳訊給細胞核內相關的基因，使整株植物產生蛋白酶抑制劑，達到防御的效果。下列有關蕃茄誘導防御機制之敘述，哪些正確？（應選三項）

A 植物體受傷時，會誘導系統素的產生

B 系統素與茉莉酸結合而活化防御機制

C 系統素在細胞壁和細胞間隙移動，進入韌皮部而傳遍全株

D 系統素將訊息直接傳遞給細胞核內相關的基因，并令其產生蛋白質抑制劑

E 茉莉酸將訊息傳遞給細胞核內的特定基因，并進而在細胞質內制造蛋白

酶抑制劑

植物雖不能動，但卻具有某些防御機制以對抗外界的傷害，如利用體表的毛、刺、幾丁質或木栓質來保護植株本身免于受傷害；也會利用囊泡內的次級代謝物（如植物堿和單寧酸等）來防御掠食者；更會分泌化學物質抑制別種植物的種子萌芽或生長，以降低資源競爭。有些植物的次級代謝物可用于制藥，如奎寧（quinine）。無論草食動物或侵略者是否存在，這些防御構造或化學物質一直存在植物體。
傷害也可誘導植物產生防御機制，如葉片被寄生蜂咬傷時，植物會快速產生與草食動物消化酵素結合的蛋白酶抑制劑。從蕃茄的實驗結果得知，受傷的葉子會將系統素前驅蛋白切割出由18個胺基酸組成的系統素（systemin），經由受傷組織的細胞壁或細胞間隙運輸到鄰近的韌皮部，再傳送到整個植物體。系統素會與細胞膜的受器結合，引起細胞內產生茉莉酸（jasmonic acid），并傳訊給細胞核內相關的基因，使整株植物產生蛋白酶抑制劑，達到防御的效果。下列有關蕃茄誘導防御機制之敘述，哪些正確？（應選三項）
A 植物體受傷時，會誘導系統素的產生
B 系統素與茉莉酸結合而活化防御機制
C 系統素在細胞壁和細胞間隙移動，進入韌皮部而傳遍全株
D 系統素將訊息直接傳遞給細胞核內相關的基因，并令其產生蛋白質抑制劑
E 茉莉酸將訊息傳遞給細胞核內的特定基因，并進而在細胞質內制造蛋白
酶抑制劑